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液相色谱柱氨基柱介绍和使用

发布时间:2019-05-16 10:12:37 作者: 点击数:

 

一、新柱活化

    正相使用;

    用异丙醇以0.5mL/min流速冲洗2h,再使用正相流动相进行平衡和测试。

    反相使用;

    异丙醇在0.5ml/min流速下转化2h,然后用甲醇或乙腈洗涤30 min,转化为反相模式。然后再更换成流动相进行平衡。

    日常维护;

    正相条件;

    正相条件下,可以直接采用流动相平衡系统,使用后用异丙醇以0.5ml/min流速反向冲洗60min,后保存在异丙醇中,正向使用;

 

    反相使用

   在反相条件下,以0.5 ml/min的流速使用异丙醇60分钟,然后用甲醇或乙腈洗涤柱30分钟以转移到反相。

   相模式。然后再更换成流动相进行平衡如果流动相中有缓冲盐,使用前用采用流动相同等比例的有机相

   和水相进行过渡,但水相中不含缓冲盐。过渡30min后再换成流动相进行平衡色谱柱

 

二、反向条件保存方法:

    流动相中如含有缓冲盐,则先用过渡流动相以1ml/min反向冲洗45min,去除缓冲眼,用10%水90%有机溶剂(甲醇或乙腈)冲洗45min,保存在90%的有机相中。

    注意事项;

    正相条件 正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析

    反相条件 pH值越低越有发生水解的危险,所以要严格控制pH范围,使其pH范围在2.0~8.0,通常建议使用范围 pH3.0~7.0比较合适;

    流动相中水相比例越高越有发生水解的危险,所以应尽量减少水在氨基柱上的保留,建议水相使用比例

    氨基柱可在甲醇、乙腈或异丙醇中保存一段较短的时间。如果长期不使用,建议将其储存在异丙醇和正己烷试剂中。

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